文章目录

1 材料和方法

1.1 材料、骨质疏松症小鼠模型构建

1.2 BMSCs分离、培养及纯化

1.3 主要试剂和仪器

1.4 RT-PCR检测

1.5 miR-21转染小鼠BMSCs

1.6 MTT法检测细胞增殖情况

1.7 BMSCs成骨诱导与茜素红染色

1.8 Western-blotting检测

1.9 统计学分析

2 结果

2.1 骨质疏松小鼠BMSCs中miR-21表达水平

2.2 miR-21转染骨质疏松小鼠BMSCs验证

2.3 miR-21对骨质疏松小鼠BMSCs增殖的影响

2.4 miR-21对骨质疏松小鼠BMSCs成骨能力的影响

3 讨论

文章摘要:目的探讨miR-21对骨质疏松小鼠骨髓基质细胞（BMSCs）增殖的影响。方法采用双侧卵巢切除法构建骨质疏松小鼠模型（VOX）,分离、培养、纯化小鼠BMSCs并采用si PORT Neo FX转染pre-miR-21、pre-miR-negative control（pre-miR-NC）、antmiR-21、ant-miR-negative control（ant-miR-NC）并进行RT-PCR验证,MTT法检测小鼠BMSCs增殖情况、茜素红与碱性磷酸酶染色法检测小鼠BMSCs成骨能力、Western-blotting检测细胞增殖、成骨分化相关蛋白水平。结果骨质疏松症小鼠BMSCs中miR-21相对表达水平低于Ctrl组（P<0.05）,OVX-pre-miR-21组BMSCs中miR-21相对表达水平、细胞增殖、PCNA水平、Ki-67水平、ALP染色程度、ALP活性、茜素红染色程度、Runx2水平、Osterix水平均高于OVX-pre-miR-NC组（P<0.05）,OVX-premiR-NC组BMSCs中miR-21相对表达水平、细胞增殖、PCNA水平、Ki-67水平、ALP染色程度、ALP活性、茜素红染色程度、Runx2水平、Osterix水平均显著低于Ctrl-pre-miR-NC（P<0.05）; OVX-ant-miR-21组BMSCs中miR-21相对表达水平、细胞增殖、PCNA水平、Ki-67水平、ALP染色程度、ALP活性、茜素红染色程度、Runx2水平、Osterix水平均显著低于OVX-ant-miR-NC组（P<0.05）,OVX-ant-miR-NC组BMSCs中miR-21相对表达水平、细胞增殖、PCNA水平、Ki-67水平、ALP染色程度、ALP活性、茜素红染色程度、Runx2水平、Osterix水平均显著低于Ctrl-ant-miR-NC（P<0.05）。结论提高miR-21表达水平可促进骨质疏松小鼠BMSCs增殖能力与成骨分化能力。

文章关键词:

论文分类号:R580

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